黃曲霉毒素檢測免疫親和柱及試劑盒

    1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織（WHO）的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為1類致癌物，是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì)。黃曲霉毒素的危害性在于對人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用，嚴(yán)重時(shí)，可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素b1最為多見。其毒性和致癌性也最強(qiáng)。
    在紫外線下，黃曲霉毒素b1,b2發(fā)藍(lán)色熒光，黃曲霉毒素g1,g2發(fā)綠色熒光.黃曲霉毒素的相對分子量為312-346.難溶于水，易溶于油，甲醇，丙酮和氯仿等有機(jī)溶劑，但不溶于石油醚，己烷和乙醚中.一般在中性溶液中較穩(wěn)定，但在強(qiáng)酸性溶液中稍有分解，在ph9-10的強(qiáng)堿溶液中分解迅速.其純品為無色結(jié)晶，耐高溫，黃曲霉毒素b1的分解溫度為268℃紫外線對低濃度黃曲霉毒素有一定的破壞性.

黃曲霉毒素菌株及典型生產(chǎn)環(huán)境

黃曲霉毒素免疫化學(xué)分析

    利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設(shè)計(jì)的黃曲霉毒素的免疫分析方法，也是最常用的黃曲霉毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法（radioimmunoassay,ria）,酶聯(lián)免疫法（enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa）和免疫層析法（immunoaflinity column assay,ica）.它們均可以對黃曲霉毒素進(jìn)行定量測定。
(1) 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術(shù)-hplc法
    免疫親和柱法和酶聯(lián)免疫吸附法雖然都可達(dá)到速簡便效果，但酶聯(lián)免疫吸附法僅能檢測單一毒素（如黃曲霉毒素b1）含量，而且易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，難以控制免疫親和柱法（包括熒光光度法和hplc法）卻能達(dá)到既定量準(zhǔn)確又快速簡便的要求。
    免疫親和柱的使用可以避免傳統(tǒng)tlc和hplc的缺點(diǎn)，同時(shí)免疫親和柱與tlc和hplc法結(jié)合可以大大提高工作效率，提高靈敏度和準(zhǔn)確度。
    黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計(jì)法是以單克隆免疫親和柱為分離手段，用熒光計(jì)，紫外燈作為檢測工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物和在樣品預(yù)處理過程中使用多種有毒，異味的有機(jī)溶劑，毒害操作人員和污染環(huán)境的缺點(diǎn).同時(shí)黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計(jì)法分析速度快，一個(gè)樣品只需10-15min,比傳統(tǒng)方法快幾個(gè)小時(shí)甚至幾天時(shí)間；儀器設(shè)備輕便容易攜帶，自動(dòng)化程度高，操作簡單，直接讀出測試結(jié)果，可以在小型實(shí)驗(yàn)或現(xiàn)場使用.可以進(jìn)行黃曲霉毒素總量 (b1b2g1g2) 的測定，檢測限可達(dá)到1ug/kg,達(dá)到黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)限量值以下測定范圍為1-300ug/kg.
    黃曲霉毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統(tǒng)的hplc法更加安全，可靠，靈敏度和準(zhǔn)確度高.它采用單克隆抗體免疫技術(shù)，可以特效性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高.
    分析原理：試樣中的黃曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液經(jīng)過過濾，稀釋后，用免疫親和柱凈化，以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高測定靈敏度，然后用熒光分光光度計(jì)進(jìn)行定量.也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分注入hplc中，對黃曲霉毒素b1,b2,g1,b2分別進(jìn)行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的黃曲霉毒素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上，然后裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg. [2]
(2) 酶聯(lián)免疫吸附法：
    1996年，nakane 建立了辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體的測定技術(shù).由于該方法簡便，敏感，特異，可作為多種抗原或抗體的測定，20世紀(jì)70年代后期，該方法引入真菌毒素的檢測中，下面介紹的是競爭性酶聯(lián)免疫吸附間接法檢測黃曲霉毒素b1.
    原理：將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面，洗除末吸附抗原，加入一定量抗體與待測樣品（含有抗原）提取液的混合液，競爭培養(yǎng)后，在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物.洗除多余抗體成分，然后加入酶標(biāo)記的抗球蛋白的第二抗體結(jié)合物，與吸附在固體表面的抗原抗體結(jié)合物相結(jié)合，再加入酶底物.在酶的催化作用下，底物發(fā)生降解反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)，通過酶標(biāo)檢測儀測出酶底物的降解量，從而推知被測樣品中的抗原量。
                                                                                                                                                                                                                                                  
    黃曲霉毒素B1檢測試劑盒
    黃曲霉毒素B1檢測試劑盒采用競爭酶聯(lián)免疫法定量測定谷物、飼料、花生、干果及其它食品中的黃曲霉毒素B1。 


    
    用甲醇/水溶液震蕩萃取粉碎樣品中的黃曲霉毒素，過濾水相萃取物后免疫學(xué)檢測。檢測原理為標(biāo)準(zhǔn)品/樣品萃取物與酶標(biāo)抗原競爭已結(jié)合連接在微孔上的抗體，反應(yīng)10分鐘后洗掉游離的標(biāo)準(zhǔn)品/樣品萃取物和酶標(biāo)抗原，加入無色的顯色液孵育5分鐘，所有結(jié)合的酶標(biāo)抗原使顯色液轉(zhuǎn)化成藍(lán)色物質(zhì)。加入停止液然后讀取吸光度值，比較未知濃度樣品與標(biāo)準(zhǔn)吸光度值，獲得樣品中黃曲霉毒素的濃度。 
產(chǎn)品特點(diǎn)：
    ● 操作簡單快速，只需15分鐘
    ● 可半定量和定量分析
    ● 可分析單個(gè)樣品，也可成批分析樣品 
    ● 檢測范圍：2-50ppb
    ● 檢測限：2ppb
    ● 回收率：70-120%

                                                                                                                                                                                                                                                  
   黃曲霉毒素B1免疫親
    黃曲霉毒素B1免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、限量要求低的樣品中黃曲霉毒素B1檢測的凈化?？梢赃M(jìn)行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過程。
    
    流速：1滴/秒
    回收率：≥85%
    1ml免疫親和柱柱容量：約150ng黃曲霉毒素B1
    3ml免疫親和柱柱容量：約200ng黃曲霉毒素B1
    檢測原理
    測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫親和柱中含有和黃曲霉毒素B1抗體結(jié)合在一起的凝膠，樣品中的黃曲霉毒素B1經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后緩慢的通過黃曲霉毒素B1免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi)黃曲霉毒素B1與抗體結(jié)合，其他的無關(guān)物質(zhì)不會(huì)結(jié)合而直接通過免疫親和柱，之后洗滌免疫親和柱完全除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。最后加入甲醇將黃曲霉毒素B1釋放，然后注入到分析儀器中進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。 

更多產(chǎn)品
真菌毒素檢測試劑盒類產(chǎn)品
品名
96 孔
檢測范圍
適用樣本
黃曲霉毒素B1檢測試劑盒
C110112-50ppb糧谷類及其產(chǎn)品
黃曲霉 B1 高敏檢測試劑盒C110130.05-1.25pb糧谷類及其產(chǎn)品
黃曲霉 M1 檢測試劑盒（高敏）C1100710-100ppt液奶、奶粉、酸奶等奶制品
黃曲霉 M1 檢測試劑盒（普通）CH1100750-600ppt液奶、奶粉、酸奶等奶制品
嘔吐毒素檢測試劑盒C110020.2-2.5ppm糧谷類及其產(chǎn)品
嘔吐毒素檢測試劑盒（寬范圍）CE110020.25-5ppm糧谷類及其產(chǎn)品
玉米赤霉烯酮檢測試劑盒C1100320-1000ppb糧谷類及其產(chǎn)品
玉米赤霉烯酮檢測試劑盒（高靈敏度）CH110036-162ppb糧谷類及其產(chǎn)品
T2 毒素檢測試劑盒C1100540-640ppb糧谷類及其產(chǎn)品
赭曲霉毒素檢測試劑盒C1101910-120ppb糧谷類及其產(chǎn)品
伏馬毒素檢測試劑盒C110090.5-6ppm糧谷類及其產(chǎn)品

真菌毒素檢測免疫親和柱類產(chǎn)品
品名規(guī)格數(shù)量貨號(hào)柱容量/ng適用樣本
黃曲霉毒素總量免疫親和柱1ml25支C14008200糧谷類及其相關(guān)產(chǎn)品（原糧、醬油醋、植物油、谷物奶、飼料類等）、中藥材
3ml20支C15008300
黃曲霉毒素B1免疫親和柱1ml25支C14001200糧谷類及其相關(guān)產(chǎn)品（原糧、醬油醋、植物油、谷物奶、飼料類等）、中藥材
3ml20支C15001300
黃曲霉毒素M1免疫親和柱1ml25支C14009100乳品類（液奶、奶粉、發(fā)酵乳、黃油和奶酪等）
3ml20支C15009150
嘔吐毒素免疫親和柱1ml25支C14002750糧谷類樣品及飼料
3ml20支C150021200
玉米赤霉烯酮免疫親和柱1ml25支C14003500糧谷類樣品及飼料
3ml20支C15003750
T2毒素免疫親和柱1ml25支C14005500糧谷類樣品及飼料
3ml20支C150051000
赭曲霉毒素免疫親和柱1ml25支C14006100糧谷類樣品及飼料
3ml20支C15006300
伏馬霉毒素免疫親和柱1ml25支C14004100糧谷類樣品及飼料
3ml20支C15004300